• <optgroup id="66050"><em id="66050"><del id="66050"></del></em></optgroup>
    <optgroup id="66050"></optgroup>
    1. <span id="66050"></span>
        <acronym id="66050"></acronym>
        <track id="66050"></track>
        <acronym id="66050"><sup id="66050"><th id="66050"></th></sup></acronym>
        <span id="66050"><sup id="66050"></sup></span>
           
           
             

          產品展示 您現在的位置:首頁 > 產品展示 > LBA4404電轉化感受態細胞
          LBA4404電轉化感受態細胞
          放大圖片
          產品名稱: LBA4404電轉化感受態細胞
          產品型號: SGn309
          CAS號:
          英文名稱:
          規格: 農桿菌電擊感受態
          包裝: 50ul*10支
          產品報價: 市場價(面議)





          上一個產品:[ AGL1電擊電轉化感受態細胞 ]
          下一個產品:[ Y1HGold感受態細胞 ]
          產品描述
          中文名稱:LBA4404電轉化感受態細胞  
          規格:50ul*10支  
          用途:生化試劑。(用于科研試驗研究)  
          保存:-80℃  
          基因型  
          Ach5(rifR)TipAL4404(strepR)Octopine  
          產品說明  
          LBA4404菌株為Ach5型背景,核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因rif,為了便于轉化操作,此菌株攜帶一無自身轉運功能的章魚堿型Ti質粒pAL4404,此質粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pAL4404質粒自身的T-DNA轉移功能被破壞,但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移)。pAL4404型Ti質粒含有篩選標簽:strep,賦予LBA4404菌株鏈霉素抗性,適用于菸草、番茄、煙草等植物的轉基因操作。LBA4404電轉感受態特別適用于大質粒的轉化:經pCAMBIA2301質粒(size:11633bp)檢測轉化效率可達104cfu/μg;經pCAMBIA2301-ZH質粒(size:40kd)檢測轉化效率可達103cfu/μg。  
          操作方法  
          1.0.2cm電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發,待乙醇揮發干凈立即插入冰中,壓實冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。  
          2.取-80℃保存的農桿菌感受態插入冰中5分鐘,待其融化,加入1-5ug質粒DNA(質粒體積不大于6ul,最好用試劑盒抽提,雙蒸水溶解),用手撥打管底混勻,立即插入冰中,用200ul槍頭將感受態-質;旌衔锟焖僖频诫姄舯,蓋上杯蓋,空管保留待用。  
          3.啟動電轉儀,設置參數:C=25uF,PC=200ohm,V=2400V(此參數為Biorad推薦,使用者也可按所用電轉儀推薦的protocol操作),將電擊杯快速放入電轉槽中,電擊完成快速插入冰中,加入700ul無抗生素的LB并轉移到感受態空管中,28℃振蕩培養2~3小時。  
          4.6000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天(當平板只含有50ug/mlkan時,28℃培養48h即可;平板中同時加入50ug/mlkan,20ug/mlrif時,需28℃培養60h;如果使用的平板含有50ug/mlrif則需要28℃培養72-90h)。  
          注意事項  
          1.感受態細胞最好在冰上融化。  
          2.混入質粒時應輕柔操作。  
          3.轉化高濃度的質?上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。

           


           
          上海士鋒生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市寶山區錦樂路 網址:m.topshouji.com 編碼:201900
           聯系人:趙經理 電話:021-56640936 手機:13122441390 15900755943 ICP備案號:滬ICP備12022871號-3 GoogleSitemap
           
          座機:
          021-56640936
          手機:
          15900755943
          13122441390
          點擊這里給我發消息
          點擊這里給我發消息
          點擊這里給我發消息
          點擊這里給我發消息
          點擊這里給我發消息
          點擊這里給我發消息
           
          狠狠色丁香婷婷综合久久来来去_久久亚洲精品无α√_中文字幕久久波多野结衣av_国产情侣草莓视频在线